Molecular analysis of rubella virus in travelers suspected of measles infection in São Paulo, Brazil / Análise molecular do vírus da rubéola em turistas suspeitos de infecção por sarampo em São Paulo, Brasil

OBJECTIVE: To identify measles virus genotypes in three cases of travelers suspected of measles infection. METHODS: Samples (blood and urine) were collected for serology, virus isolation, and genotyping. Sera were analyzed for IgM antibodies against measles virus and rubella virus by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) (Siemens - Marburg, Germany). Clinical samples (lymphocytes and urine) were inoculated into Statens Serum Institute rabbit corneal epithelial cell line- ATCC CL 60 (SIRC) and Vero Slam cells. RNA was extracted from clinical samples and cell culture was inoculated and processed by polymerase chain reaction (PCR) with oligonucleotides specific for measles virus (MV) and rubella virus (RV). RESULTS: All patients showed IgM negative serology for MV and positive IgM for RV. RV belonging to genotypes 1B, 1C, and 1E were isolated from patients who came from Finland, Peru, and Germany, respectively. Genotype 1B has been found in Europe and on the East Coast of South America; 1C has been found in Peru and the West Coast of South America, and 1E, first identified in 1997, now appears to have worldwide distribution. CONCLUSION: Information about RV and MV genotypes circulating in São Paulo is essential for the control of measles, rubella, and congenital rubella syndrome (CRS) in Brazil.

OBJETIVO: Identificar o genótipo do vírus do sarampo em três viajantes suspeitos de infecção por sarampo. MÉTODOS: Amostras (sangue e urina) foram coletadas para sorologia, isolamento viral e genotipagem. As sorologias para pesquisa de IgM para o vírus do sarampo e da rubéola foi realizada utilizando-se o kit de ELISA (Siemens - Marburg, Alemanha). As amostras clínicas (linfócito e urina) foram inoculadas na SIRC (Statens Serum Institute rabbit corneal epithelial cell line-ATCC CL 60) e nas células Vero Slam. O RNA foi extraído das amostras clínicas e das células inoculadas e processadas por PCR, utilizando oligonucleotideos específicos para sarampo e rubéola. RESULTADOS: Todos os pacientes apresentaram sorologia IgM negativa para sarampo e positivo para rubéola. Os vírus da rubéola isolados dos pacientes que vieram da Finlândia, Peru e Alemanha pertencem aos genótipos 1B, 1C e 1E, respectivamente. O genótipo 1B foi encontrado na Europa e na costa oriental da América do Sul, o genótipo 1C foi encontrado no Peru e na costa oeste da América do Sul e o genótipo 1E, identificado pela primeira vez em 1997, agora aparenta ser um genótipo com distribuição mundial. CONCLUSÃO: O conhecimento dos genótipos de sarampo e rubéola que circulam em São Paulo é essencial para o controle do sarampo, rubéola e síndrome da rubéola congênita.

Síndrome de rubéola congénita: primer caso en Chile post programa de revacunación / Congenital rubella syndrome after rubella revaccination program: first chilean case

Se presenta el primer caso clínico de síndrome de rubéola congénita en Chile, posterior al programa de revacunación en 1999. Se describe el caso índice y se realiza una breve revisión actualizada del tema.

We present the first clinical case of congenital rubella syndrome (CRS) in Chile after the preconceptional vaccination campaign in 1999. This report describes the case and we present a brief review of CRS.

Seroprevalence and incidence of rubella in and around Delhi (1988-2002).

National Institute of Communicable Diseases (NICD) has been engaged in rubella testing for serodiagnosis of the infection and screening for immunity status. The compiled and evaluated data of the work done on rubella testing for the past fifteen years has been presented here to show the trend and changing scenario of the disease in Delhi. Blood samples were from 7424 patients referred to NICD, Delhi for serodiagnosis of congenital Rubella syndrome (CRS) in malformed babies, in utero rubella infection in women and immunity status of pregnant women and women with bad obstetric history. They were tested for rubella IgG and/or rubella IgM antibodies using commercially available reagents and kits. The data from the 15 years of testing was then compiled and evaluated. From the available data it was seen that immunity status against rubella in childbearing age group of women increased steadily from 49% in 1988 to 87% in 2002. Reported cases of CRS at NICD are also on the decline over the time period. There is periodic indication of high incidence of rubella in the year 1988; 1991 and 1998 as the reported cases of acute rubella infection in childbearing age group is high during these years.

Isolation of the wild-type rubella virus in rabbit kidney cell line RC-IAL

O presente estudo descreve o isolamento e o crescimento do vírus selvagem da rubéola na linhagem celular RC-IAL. A susceptibilidade da linhagem celular RC-IAL (rim de coelho, Instituto Adolfo Lutz) para o vírus-padrão da rubéola RA 27/3 foi anteriormente descrito por nós(4). Amostras de 20 pacientes com suspeita de infecção por rubéola foram testadas por sorologia, isolamento viral e nested PCR. Os soros foram testados por Elisa para detecção de anticorpos reagentes para rubéola e nested PCR para detectar o RNA viral. As amostras clínicas de sangue, urina, fragmento de placenta e líquido amniótico foram inoculadas nas linhagens celulares RC-IAL (rim de coelho, Instituto Adolfo Lutz) e Sirc (córnea de coelho). O vírus da rubéola foi isolado das amostras clínicas de quatorze pacientes. O efeito citopático (ECP) foi examinado por microscopia de contraste de fase, e o RNA do vírus da rubéola foi amplificado por nested PCR. Os resultados obtidos mostram que a linhagem celular RC-IAL é um excelente substrato para isolamento do vírus da rubéola. Estes dados são importantes, pois poucas linhagens descritas na literatura apresentam efeito citopático que possibilite seu uso para isolar o vírus da rubéola de material clínico.

Infectivity of wild-type rubella virus in fibrochondrocyte cells

Este trabalho descreve o rápido crescimento do vírus da rubéola em amostras clínicas em cultura primária de fibrocondrócitos com desenvolvimento de efeito citopático em resposta a infecção pelo vírus da rubéola. As células foram isoladas do menisco do joelho do coelho após extração enzimática e incubadas a 37ºC em meio DMEM suplementado com 10 por cento de soro fetal bovino. Seis amostras clínicas de urina, sangue e liquor foram inoculadas na cultura primária de fibrocondrócitos e na linhagem Vero. As células de fibrocondrócitos apresentaram efeito citopático após 24 horas de incubação e o vírus foi detectado por imunoistoquímica e Nested PCR. As células infectadas apresentaram aspecto arredondado, com formação de alguns prolongamentos citoplasmáticos e sincícios, produzindo células multinucleadas. A curva de crescimento da infecciosidade do vírus foi mais alta quando comparada com a linhagem celular Vero.

Detection of rubella virus RNA in serum samples by RT-PCR assay / Detecçäo do RNA do vírus da rúbeola no soro através de RT-PCR

Em geral, a reaçäo de polimerizaçäo em cadeia precedida de retrotranscriçäo (RT-PCR) tem demonstrado ser um método rápido e sensível para detectar o RNA do vírus rubéola em uma variedade de materiais clínicos. A reaçäo de RT-PCR foi utilizada para detectar o vírus no soro e confirmar o teste sorológico em indivíduos infectados com vírus da rubéola. Para este estudo, uma fita simples de RNA viral, extraída do soro, foi usada como fita-molde para para a transcriçäo reversa, seguida da amplificaçäo com dois diferentes pares de olinucleotídeos iniciadores e de uma segunda amplificaçäo com outros pares de oligonucleotídeos. O método do RT-PCR foi utilizado para se examinar amostras de soro de nove pacientes com sorologia confirmada para o vírus da rubéola. Quatro soros testados por RT-PCR tiveram como resultado infecçäo pelo vírus da rubéola. Os soros foram primeiramente analisados utilizando-se de 500µl para a extraçäo de RNA. O vírus da rubéola foi também analisados utilizando-se 500µl para a extraçäo de RNA. O vírus da rubéola foi também analisado utilizando-se volumes menores de soro, e somente uma amostra foi amplificada a partir da extraçäo do RNA viral de 300µl. Neste estudo, a estratégia de se utilizar soro no desenvolvimento do teste RT-PCR sugere ser uma alternativa a mais para o diagnóstico da infecçäo pelo vírus da rubéola

immune status of adult females in Karachi to rubella virus infection

To determine the prevalence of anti-rubella antibody in female of child bearing age in Karachi, to make an empirical evaluation of the need for immunization in order to prevent rubella infections during pregnancy and its sequelae. Design: From 1988 to 1994 7,788 woman attending various maternity homes for antenatal checkup were included in this study. Setting: Department of Microbiology Citi Lab, Civil Lab and Dr. Ehsanullah's Laboratories, Karachi. Seven thousand seven hundred eighty eight blood samples from pregnant females attending various maternity homes for antenatal checkup. Main outcome measures: Rubella IgG anti-bodies by Enzyme Linked Immuno sorbent Assay. All the 7,788 sera were screened by the Enzyme Immuno-Assay. Up to 90% were found to be seropositive for Rubella antibody of the IgG class. Conclusions: Pregnant women susceptible to rubella infection in the present study varied from 10-25% in differerent years. Clinical or subclinical rubella infection and immunization have contributed to 75-90% seroprevalence of rubella antibody. Therefore, risk of rubella infection during pregnancy is low and mass immunization will not be cost effective

Enzyme linked immunosorbent assay for rubella antibodies: a simple method of antigen production: a preliminary report

Um metodo simples de producao de antigeno de virus da rubeola, por extracao com desoxicolato de sodio para aplicacao no ensaio imunoenzimatico, IMT-ELISA, e apresentado...